期刊简介
本刊创刊于1986年，刊物开设栏目有：专家述评、论著、临床经验、研究简报、个案报道、医疗纠纷案例分析、综述、生殖健康、青年医学论坛、读者编者和作者、专家英语导读以及国内外男科学动态等。文章内容涉及到男科学各领域：男女性功能障碍、生育与绝育、男性性传播疾病、前列腺疾病、男子更年期、男性抗衰老等。
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首页>中国男科学杂志
- 杂志名称：中国男科学杂志
- 主管单位：中华人民共和国国家计划生育委员会
- 主办单位：上海交通大学医学院,国家人口和计划生育委员会科学技术研究所
- 国际刊号：1008-0848
- 国内刊号：31-1762/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：上海科技期刊优秀奖期刊收录：统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 维普收录(中), 文摘与引文数据库, 万方收录(中), 国家图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 医学文摘, 知网收录(中)
穿膜肽EGFP的构建及其对人成熟精子的穿膜活性鉴定
陈厚仰；仇克清；孙捷；黄志辉；应志伟；吴丽萍；曾韩；伍琼芳
关键词：细胞穿膜肽, 绿色荧光蛋白, 精子
摘要：目的：构建穿膜肽TAT与EGFP融合蛋白的原核表达系统，研究该融合蛋白对人成熟精子的穿膜作用和对精子运动参数的影响。方法以pEGFP-N1载体为模板，设计N端和C端含有TAT序列的引物，用PCR技术扩增TAT-EGFP和EGFP-TAT基因，扩增产物插入载体 pET28a，构建成重组质粒pET28a-TAT-EGFP和pET28a-EGFP-TAT。将重组质粒转入大肠杆菌DE3中，IPTG诱导TAT-EGFP和EGFP-TAT融合蛋白表达。表达产物经Ni-NTA亲和层析柱纯化后SDS-PAGE电泳鉴定。将融合蛋白TAT-EGFP和EGFP-TAT分别加入正常人精子中孵育，荧光显微镜观察融合蛋白TAT-EGFP和EGFP-TAT穿膜情况。结果成功构建了高表达重组质粒pET28a-TAT-EGFP和pET28a-EGFP-TAT，纯化了分子质量约为32 kD的融合蛋白 TAT-EGFP和EGFP-TAT。融合蛋白TAT-EGFP和EGFP-TAT在正常人成熟精子中有穿膜作用。不同浓度的融合蛋白TAT-EGFP和EGFP-TAT对正常人成熟精子存活率及运动参数无明显影响。结论通过对融合蛋白TAT-EGFP和EGFP-TAT表达纯化及活性分析，证实穿膜肽TAT在精子中的跨膜转运作用，为将来精子研究提供了实验基础。
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